用显微镜进行DNA的Feulgen反应的实验

用显微镜进行DNA的Feulgen反应的实验

用生物显微镜进行DNA的Feulgen反应的实验
正文：
一、实验目的
Feulgen 反应是专一性染DNA的反应，是经典的细胞化学方法，通过实验使学生掌握Feulgen染色的技术。
二、实验原理
    DNA经弱酸（1mol/LHCL）水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团，所以具有颜色。对照组预先用热三氯醋酸或DNA酶处理，抽提去细胞中的DNA而得到阴性反应，从而证明了Feulgen反应的专一性。
三、试剂与器材
 1.材料：Carnoy液固定的鼠肝石蜡切片 Carnoy液固定的洋葱根尖或蚕豆根尖切片
 2.试剂：Carnoy固定液 1mol/LHCL Schiff试剂  亚硫酸水溶液 5%三氯乙酸 0.5%固绿酒精溶液
 3.实验器材：微生物显微镜、载波片、盖波片、刀片、吸水纸镜头纸、恒温水浴锅、剪刀、表面皿、凹面载玻片
四、实验内容
兔肝石蜡切片（洋葱根尖石蜡切片）→脱蜡→复水→1mol/L HCl水解（60℃）→Schiff试剂染色避光→分色→亮绿复染→显微镜下观察  
五、关键步骤及注意事项
1. Schift试剂的配置；掌握好HCl水解的时间；Schift试剂染色时注意遮光。
六、思考题
1. 说明Feulgen 反应中设立的对照组的必要性。
2. 简图表示Feulgen 反应的染色结果。