用显微镜做土壤中微生物分离纯化培养

用显微镜做土壤中微生物分离纯化培养

用显微镜做土壤中微生物分离纯化培养                  
实验类型：综合
内    容：
一、实验目的
掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。(生物倒置显微镜）

二、实验原理
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法
稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落
平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线

三、试剂与器材
 1.器材 盛9m1无菌水的试管、盛90m1无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、酒精灯、无菌培养皿、倒置显微镜、血细胞计数板等。
 2.试剂 牛肉膏蛋白胨培养基，高氏1号培养基，查氏培养基

四、实验内容
1.土壤稀释液的制备
2.微生物分离纯化：稀释涂平板法，平皿划线分离法，微生物培养技术

五、关键步骤及注意事项
1.掌握含菌培养基的配制，严格控制温度。
2.平板划线应防止染菌，同时应注意划线深度及密度。

六、思考题
1.如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养?请写出实验的主要步骤。
2.如果要分离得到极端嗜盐细菌，在什么地方取样品为宜?并说明理由。